产品货号：
ALH001
中文名称：
细胞组织总RNA提取试剂
英文名称：
Total RNA extraction reagent From Tissue or Cell
产品规格：
50ml|100ml
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心，样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后，RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后，样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA，在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织，该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。本试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。本试剂抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR，当两条引物位于单一外显子内时，建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
本试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如，从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色，可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分)，两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
储存条件：室温，有效期12个月。
注意事项：
1. 当本试剂用量少于2ml时建议使用清洁的一次性的聚丙材质试管。
2. 当本试剂用量较大时，可以使用玻璃试管(Corex)或聚丙材质试管，事先检验以确保该试管可以耐受加入本试剂和氯仿后12,000×g的离心力。不可使用有裂缝或者破损的试管。
3. 离心前小心平衡试管。
4. 离心前玻璃管口必须盖上铝箔并用石蜡膜封口，聚丙烯管必须盖紧。
5. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA 样品：往组织或细胞中加入800μl 本试剂。待样品裂解后，加入氯仿并进行步骤2 中的抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA 之前，加入5~10μg 无RNA 酶的glycogen 作为水样层的载体。为降低其黏度在加入氯仿前用26 号注射器抽吸两次以切断基因组DNA。Glycogen 会留在水样层中并和RNA 共析出。在浓缩到4mg/ml 之前它不会抑制逆转录反应第一链的合成也不会抑制PCR。
6. 在匀化后和加入氯仿之前，样品可以在–60～–70℃ 保存至少一个月。RNA 沉淀（步骤4，RNA 漂洗）溶于75%的乙醇在2~8℃ 至少可以保存一周，在–5~–20℃ 下至少可保存一年。
7. 台式离心机最大能达到2,600×g 的离心力，如果将离心时间延长到30~60 分钟可以满足步骤2 和步骤3 中的操作。
本制品别名：总RNA纯化试剂|组织总RNA提取试剂|细胞总RNA提取试剂
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无论是人、动物、植物还是细菌组织，该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。本试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。本试剂抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR，当两条引物位于单一外显子内时，建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
本试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如，从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色，可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分)，两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
储存条件：室温，有效期12个月。
注意事项：
1. 当本试剂用量少于2ml时建议使用清洁的一次性的聚丙材质试管。
2. 当本试剂用量较大时，可以使用玻璃试管(Corex)或聚丙材质试管，事先检验以确保该试管可以耐受加入本试剂和氯仿后12,000×g的离心力。不可使用有裂缝或者破损的试管。
3. 离心前小心平衡试管。
4. 离心前玻璃管口必须盖上铝箔并用石蜡膜封口，聚丙烯管必须盖紧。
5. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA 样品：往组织或细胞中加入800μl 本试剂。待样品裂解后，加入氯仿并进行步骤2 中的抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA 之前，加入5~10μg 无RNA 酶的glycogen 作为水样层的载体。为降低其黏度在加入氯仿前用26 号注射器抽吸两次以切断基因组DNA。Glycogen 会留在水样层中并和RNA 共析出。在浓缩到4mg/ml 之前它不会抑制逆转录反应第一链的合成也不会抑制PCR。
6. 在匀化后和加入氯仿之前，样品可以在–60～–70℃ 保存至少一个月。RNA 沉淀（步骤4，RNA 漂洗）溶于75%的乙醇在2~8℃ 至少可以保存一周，在–5~–20℃ 下至少可保存一年。
7. 台式离心机最大能达到2,600×g 的离心力，如果将离心时间延长到30~60 分钟可以满足步骤2 和步骤3 中的操作。
本制品别名：总RNA纯化试剂|组织总RNA提取试剂|细胞总RNA提取试剂
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